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        首页 血管内皮生长因子165-是分泌型可溶性蛋白,能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖

        血管内皮生长因子165-是分泌型可溶性蛋白,能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖.doc

        血管内皮生长因子165-是分泌型可溶性蛋白,能直接作用于血管内…

        袁得贤
        2019-02-23 0人阅读 0 0 0 暂无简介 举报

        简介:本文档为《血管内皮生长因子165-是分泌型可溶性蛋白,能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖doc》,可适用于医药卫生领域

        血管内皮生长因子是分泌型可溶性蛋白能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖?血管内皮生长因子是分泌型可溶性蛋白能直接作用于血管内皮细胞促进血管内皮细胞增殖增加血管通透性。学术术语来源人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子双基因真核表达载体的构建与鉴定文章亮点:在基因治疗中联合应用多个具有协同作用的治疗基因通常可产生?#31995;?#22522;因更为理想的效果。实验将人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子双基因成功插入到了双顺反子真核表达载体pIRES(内部核糖体进入位点)中采用一种简便和高效的方法成功构建了pIRESGDNFVEGF双基因共表达载体。关键词:组织构建组织工程胶质细胞源性神经营养因子血管内皮生长因子真核双表达载体内部核糖体进入位点转染双PCR主题词:胶质细胞源性神经营养因子血管内皮生长因子载体蛋白质类组织工程摘要背景:人胶质细胞源性神经营养因子(glialcelllinederivedneurotrophicfactorGDNF)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactorVEGF)在细胞分化过程中有重要作用。目的:构建双基因共表达载体pIRESGDNFVEGF并对其进行鉴定。方法:采用PCR法从人外周血单个核细胞的基因组DNA中获取人胶质细胞源性神经营养因子基因然后将人胶质细胞源性神经营养因子的cDNA片段插入到pIRESEGFP多克隆位点构建成为pIRESGDNFEGFP。人血管内皮生长因子cDNA片段是通过双PCR的方法从pIRESVEGFEGFP质粒中获取接着将血管内皮生长因子cDNA片?#25105;?#26367;换EGFP的方式插入pIRESBDNFEGFP中最后构建成为含有内部核糖体进入位点(IRES)的pIRESGDNFVEGF双基因共表达载体。通过双酶切和DNA测序方法对其鉴定将重组的双基因共表达载体感染HEK细胞利用RTPCR与Westernblot方法检测双基因的表达。结果与结论:DNA测序显示提取的人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子均与基因库报道序列一致相对分子质量分别为bp和bp。构建的pIRESGDNFVEGF双基因共表达载体经BglIIBamHI切出GDNF条带经BamHINotI双酶切后切出IRESVEGF片段经BglIINotI双酶切后切出GDNFIRESVEGF片段。RTPCR与Westernblot方法检测显示此载体转染后HEK细胞均能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子mRNA和蛋白。?#24471;?#23454;验成功构建了能表达人胶质细胞源性神经营养因子和血管内皮生长因子的双基因真核表达载体。中国组织工程研究杂志出版内容重点:组织构建骨细胞软骨细胞细胞培养?#19978;?#32500;细胞血管内皮细胞?#20405;适?#26494;组织工程??

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